Nom de la línia: ES[5]
Origen: embrionari

Dades relatives a la mostra biològica:
Embrió humà criopreservat en dia +2 de desenvolupament.
Congelació: 7.05.2001
Donació: 14.03.2006
Recepció en el Banc de Línies Cel·lulars del CMR[B]: 16.10.2006
Descongelació: 16.10.2006

Descripció general del procés previ utilitzat:
L’embrió criopreservat donat va ser descongelat mitjançant un protocol lent amb PROH i sacarosa. Després de 4 dies en cultiu, un cop arribat al estadi de blastocist, es va eliminar la zona pel·lúcida (ZP) del embrió amb àcid Tyrodes. Es va sembrar i es va cultivar el blastocist sense ZP sobre una monocapa de fibroblasts irradiats i medi de cultiu hES.

Suport cel·lular i medi de cultiu utilitzats per a la derivació:
Suport cel·lular: human foreskin fibroblasts (ATCC, American Type Culture Collection, CCD1112Sk).
Medi de cultiu: Knockout Dulbecco’s modified Eagle’s medium supplemented with 2 mmol/l GlutaMAX (Gibco, InVitrogen corporation), 0,05mmol/l 2-mercaptoethanol (Gibco, InVitrogen corporation), 8 ng/ml basic fibroblast growth factor (bFGF) (Invitrogen), 1% non-essential amino acids (Cambrex), 20% Knockout Serum Replacement (InVitrogen) y 0,5% Penicillin-Streptomycin (Gibco, InVitrogen corporation).

Descripció general del procés de derivació i manteniment de la línia:
Es va observar un agregat cel·lular amb morfologia característica de cèl·lules indiferenciades entre creixement diferenciat. Després d’15 dies de cultiu va ser dissociat mecànicament i ressembrat en una nova monocapa de fibroblasts. El període entre passes es de 6-7 dies. Els passes es realitzen de forma mecànica.

El protocol de congelació de les colònies és un protocol lent amb 90% FBS (sèrum fetal boví) i 10% DMSO (dimetil sulfòxid).

Caracterització ES[5]

Cariotip ES[5]

Documentació en format PDF

ES[5] (61,6 Kb)