Nombre de la línea: [K]iPS3F-7
Origen: Biopsia de queratinocitos humanos procedentes de epidermis de prepucio

Datos relativos a la muestra biológica
:
Donación: 26.04.2008
Recepción en el Banco de Líneas Celulares del CMR[B]: 27.04.2008

Descripción general del proceso utilizado:

Se recoge la biopsia en medio para keratinocitos libre de suero y bajo en calcio (Epilife, Invitrogen) que contiene tres tipos de antibióticos (100U/mL pen-strept. y 10 g/mL amf.Se coloca la biopsia en una placa (10 mm), se corta en varios trozos y se incuba 12-18h a 4ºC en dispasa diluida en medio de keratinocitos para separar la dermis de la epidermis. Se separa la epidermis de la dermis con la ayuda de unas pinzas. Se incuba 1º min a 37ºC en tripsina al 25%. Se añade medio de keratinocitos fresco y se lava a 1200 rpm 5 min. Se resuspende el pellet y se cultiva en medio Epilife en placas cubiertas con
colágeno tipo I.


Soporte celular y medio de cultivo utilizados para la derivación:
Soporte celular: human foreskin fibroblasts (ATCC, American Type Culture Collection, CCD1112Sk).
Medio de cultivo: Knockout Dulbecco’s modified Eagle’s medium supplemented with 2 mmol/l
GlutaMAX (Gibco, InVitrogen corporation), 0,05mmol/l 2-mercaptoethanol (Gibco, InVitrogen corporation), 8 ng/ml basic
fibroblast growth factor (bFGF) (Invitrogen), 1% non-essential amino acids (Cambrex), 20% Knockout Serum Replacement
(InVitrogen) y 0,5% Penicillin-Streptomycin (Gibco, InVitrogen corporation).

Caracterización [K]iPS3F-7

Código

[K]iPS3F-7
   

CARACTERÍSTICAS

 
   

Pase Nº

 22
   

Feeders

 Fibroblastos humanos de prepucio
   

Cariotipo

 46,XY

 

 

Fenotipado

 

 Oct 4

 +

 Nanog

 +

 Sox 2

 +

 SSEA3

 +

 SSEA4

 +

 TRA-1-60

 +

 TRA-1-81

 +

 Fosfatasa Alk.

 +

 

 

 

 

Viabilidad congelación/descongelación

 si

 

 

Pluripotencialidad

 
 In vivo  si

 In vitro:

ectodermo  (Tuj1)/GFAP

endodermo FoxA2/(α-fetoproteína)

mesodermo Gata4/(α-actina sarcomerica)

 +

 +

 +

   

 Análisis microbiológico

 

 Micoplasma

 -

 

 

 Tipaje HLA

 realizado

 

 

 Huella molecular

 realizado

Cariotipo[K]iPS3F-7

Documentación en formato PDF

[K]iPS3F-7


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