Líneas disponibles > Características de línea celular ES[4]

Nombre de la línea: ES[4]
Origen: embrionario

Datos relativos a la muestra biológica:
Embrión humano criopreservado en día +2 de desarrollo
Congelación: 26.01.2002
Donación: 26.04.2006
Recepción en el Banco de líneas celulares del CMR[B]: 16.10.2006
Descongelación: 16.10.2006

Descripción general del proceso previo utilizado:
El embrión criopreservado donado fue descongelado mediante un protocolo lento con PROH y sacarosa. Tras 4 días de cultivo, una vez alcanzado el estadío de blastocisto, se eliminó la zona pelúcida (ZP) del embrión mediante ácido Tyrodes. Se sembró y co-cultivó el blastocisto desprovisto de ZP sobre una monocapa de fibroblastos irradiados y medio de cultivo hES.

Soporte celular y medio de cultivo utilizados para la derivación:
Soporte celular: human foreskin fibroblasts (ATCC, American Type Culture Collection, CCD1112Sk).
Medio de cultivo: Knockout Dulbecco’s modified Eagle’s medium supplemented with 2 mmol/l GlutaMAX (Gibco, InVitrogen corporation), 0,05mmol/l 2-mercaptoethanol (Gibco, InVitrogen corporation), 8 ng/ml basic fibroblast growth factor (bFGF) (Invitrogen), 1% non-essential amino acids (Cambrex), 20% Knockout Serum Replacement (InVitrogen) y 0,5% Penicillin-Streptomycin (Gibco, InVitrogen corporation).

Descripción general del proceso de derivación y mantenimiento de la línea:
Se observó un agregado celular con morfología característica de células indiferenciadas entre crecimiento diferenciado y tras 11 días de cultivo fue disociado mecánicamente y resembrado en una nueva monocapa de fibroblastos. El periodo entre pases es de 6-7 días. Los pases se realizan de forma mecánica.

El protocolo de congelación de las colonias es un protocolo lento con 90% FBS (suero fetal bovino) y 10% DMSO (dimetil sulfóxido).


Caracterización ES[4]

Código

ES[4]

 

 

Origen embrión

FIV Institut Dexeus

 

 

CARACTERISTICAS

 

 

 

Feeders

Human foreskin Fibroblasts

 

 

Aislamiento MCI

no

 

 

Cariotipo

46, XY

 

 

Fenotipado

 

SSEA-1

-

SSEA-3

+

SSEA-4

+

TRA1-60

+

TRA1-81

+

Oct4

+

Sox 2

+

Nanog

+

Fosfatasa Alcalina

+

 

 

Viabilidad congelación/descongelación

si

 

 

Pluripotencialidad

 

In vivo

si

In Vitro:
   ectodermo (β-tubulina III)
   endodermo (α-fetoproteina)   
   mesodermo (myosina)

 

+
+
+

 

 

Análisis microbiológico

 

Aerobios

-

Anaerobios

-

Hongos

-

Micoplasma

-

 

 

Tipaje HLA

realizado

 

 

Huella molecular

realizado


Cariotipo ES[4]


Documentación en formato PDF

ES[4] (61,6 Kb)



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